家禽实用免疫接种技术
一、禽类的免疫系统
禽类免疫系统具有抵御传染性疾病因子的入侵及其所造成的危害的功能 , 同时 , 它具备免疫记忆能 力 , 在某一特定致病因子再次入侵时产生更快、更为有效的免疫应答。 维持禽类免疫系统功能正常发挥可通过改善环境 、 强化生物安全措施来实现 , 如： 维持合理饲养密度 , 保温 , 湿度 , 通风 ; 公母比例恰当或分饲 ;
环境卫生 ; 鸡苗质量 ; 营养平衡 ; 减少应激 ; 控制免 疫抑制性疾病 ; 正确免疫接种等。 通过接种疫苗 , 使家禽免疫系统产生主动免疫 , 以防制某些特定传染性疾病 , 保障生产效益。 通过种鸡接种疫苗 , 传给下一代 , 预防蛋传疾病及早期感染。主要靠母抗的传染病为有 : 传染性贫 血病 (CAA) 、禽脑脊髓炎 (AE) 、传染性法氏囊病 (IBD) 、传染性呼肠孤病 (REO) 。后两者种鸡要打油 苗。 免疫失败是指疫苗接种后无法剌激鸡群产生相应的抗体或免疫反应。其造成的原因如下 : ①疫苗储存 , 使用不当 , 或稀释过度 , 或疫苗本身质量低劣 , 所造成的失败。 ②家禽已经潜伏感染疫苗所要预防的疾病。 ③家禽遗传特性和免疫反应的差异所致的失败。 ④母源抗体的干扰 。 ⑤家禽已感染免疫抑制疾病。
二、接种疫苗时应遵循的原则
2.1 接种前对疫苗质量进行检查 , 若有以下情形之一者 , 应弃之不用 ① 没有标签 , 无头份和有效期或不清者。 ② 疫苗瓶破裂或瓶塞松动者。 ③ 生物制品质量与说明书不符 , 如色泽、沉淀发生变化 , 瓶内有异物或已发霉者。 ④ 过了有效期者。 ⑤ 未按产品说明和规定进行保存的疫苗。 2.2 使用前认真阅读产品说明书、注意事项和疫苗生产商所推荐的使用方法 疫苗稀释 , 应按说明所规定或相应稀释液进行稀释 , 注意水的质量要求 , 稀释时应反复冲洗以防疫 苗损失 , 并小心操作 , 避免疫苗漏失。 2.3 器械消毒 ①疫苗接种用注射器、针头、镊子、滴管、稀释用的瓶子要事先清洗 , 并用沸水煮 15～30 分钟消毒 , 切不可用消毒药消毒。 ②一个注射器和针头注射一定数量禽只后 , 一定要换用新的 , 如果有疫情发生 , 宜一只禽只用一个 针头 , 但现实中只有原种鸡场能做到 , 国内已有很多种鸡场会每100～500 只禽更换一个针头。 2.4 禽群的健康状况 ① 有病或不健康禽群不宜接种。 ② 在恶劣气候条件下也不应该接种。 ③ 免疫接种前后 , 加强饲养管理。 2.5 应按规定妥当保存疫苗
三、疫苗的类型与接种方式
活苗 : 可用多种方式接种。 灭活苗 : 只能通过注射途径接种。
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免疫接种方法 : 活苗 : 滴鼻、点眼、翅种、皮下、肌注、喷雾、饮水、蛋内接种。 灭活苗 : 皮下、肌注。 主要活苗及接种方法
新城疫 传支 脑脊 髓炎 法氏 囊 传喉 鸡痘 鸡肿头综 合症 马立克 鸡球 虫病 鸡沙门 氏菌 支原 体 鸡传染 性贫血 网状内皮组织 增殖症
滴鼻 点眼 翅种 饮水 喷雾 皮下 肌注 蛋内
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3.1 点眼 / 滴鼻免疫 3.1.1 重要性及优点 ① 确保每只鸡都能得到准确的疫苗量。 ② 免疫效果来得快。 ③ 适用于任何年龄的鸡只。 ④ 操作简单 , 但增加劳动强度。 ⑤ 属于局部免疫 : 上皮粘膜免疫系统建立第一道免疫屏障。同时也是基础免疫。针对性较强。 3.1.2 缺点 ① 免疫持久性差 ; ② 个体差异大 ; ③ 操作要求准确 ; ④ 劳动强度高。 3.1.3 接种方法 ①以无菌稀释液溶解所需的疫苗量 ( 通常1000 份疫苗使用 30 毫升稀释液 ) 。 ②通常在稀释液中加有着色剂 , 并附带一种专用滴嘴。 ③使用标准滴嘴将 1 滴溶解好的疫苗溶液 ,自 3 厘米的高度滴入鸡的眼睛或鼻孔内。 ④免疫时滴嘴不得接触眼球 , 以免损伤眼睛。 ⑤滴鼻免疫时 , 用指头封住一侧鼻孔 , 以确保疫苗能更好地从另一侧鼻孔吸入 。 ⑥接种过程中 , 要始终保持滴嘴绝对垂直 , 以确保每滴疫苗的接种剂量保持恒定 ( 注意疫苗瓶角 度 ) 。 ⑦必须确保每只鸡都接种到正确的疫苗量。 ⑧检查口中着色剂。 ⑨注意接种过程中疫苗温度。 注意点 : ①加强操作人员责任心 ; ②正确保存、使用疫苗 ; ③加强操作前培训; ④防止漏免、剂量不准、伤眼、过量、鸡甩掉、加强监督和考核 , 免疫前后检测抗体水平变化。 3.2 饮水免疫
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3.2.1 重要性及优点 ① 每只鸡都较易得到疫苗 ; ② 达到快速免疫 ; ③ 适用于任何年龄的鸡只 ; ④ 操作简便。 3.2.2 缺点 ① 免疫持久性差 ; ② 缺呼吸道局部免疫 ; ③ 个体差异大 ; ④ 每只鸡得到的疫苗量不确切 ; ⑤ 容易造成滚动反应 (Ro1ling reaction); ⑥ IB 一 ILT 反应大 。 3.2.3 接种方法 ①饮水器的清洗 ·将饮水器清洗干净 ·48 小时前禁用一切消毒剂和洗洁剂 ·饮水器具应放在阴凉处 , 避开强光线和热 ·在夏天 , 应选择清早进行 ②停水 ·免疫前视天气情况停止饮水 2 小时 , 免疫后经 1/2 小时再正常供水 ·为确保免疫效果 , 应在 2 小时内让所有小鸡饮下足够的疫苗剂量 ③水的质量 ·必须保证饮用水的质量 ·应使用清洁、不含氯和铁的自来水或雨水。 井水可能含有重金属 , 有机物 , 地面流入的细菌或 污物 ④ 水量 溶解疫苗所需的水量取决于鸡的日龄和环境的温度和湿度。大致的标准是 : 疫苗剂量 2500头份 1000头份 2～4周龄鸡只饮水量 25～50升 10～20升 4周龄以上鸡只饮水量 50～100升 20～40升
注 : 重型鸡或天气炎热时 , 饮水量应取上限。 ⑤ 准备足够的饮水槽和饮水器 肉鸡至少提供 : 钟式饮水器 :1 个 /100 只鸡 乳头式饮水器 :1 个 /15 只鸡 杯式饮水器 :1 个 /30 只鸡 6 号饮水槽 :1 个 /150 只鸡 8 号饮水槽 :1 个 /200 只鸡 注意点 : 最好选择塑料类饮水器具 ; 国外一般通过乳头状饮水器供水的饮水系统进行活苗的免疫 。 ⑥ 疫苗的准备 ·在饮水中加水脱脂牛奶或脱脂奶粉 , 可提高病毒疫苗的稳定性 。 ·在水里开启疫苗瓶 , 以清洁的棒进行搅拌 ,将疫苗和水充分混匀。 注意点 :
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① 加强操作人员责任心 ; ② 正确保存、使用疫苗 ; ③ 加强操作前培训 ; ④ 饮水器清洗干净保证水的质量、避免停水不当 ; ⑤ 加强监督和考核 , 免疫前后检测抗体水平变化。 3.3 皮下 / 肌肉注射 3.3.1 重要性及优点 ① 确保每只鸡都能得到准确的疫苗量。 ② 免疫效果来得快。 ③ 适用于任何年龄的鸡只 。 3.3.2 缺点 应激大、操作要求准确、劳动强度高、缺呼吸道局部免疫、局部反应、产蛋鸡的影响。 3.3.3 注射器 ①接种过程中应定时调校连续注射器 , 杜绝连续注射器滴漏现象 / 气泡出现。 ②注射器具严格消毒 , 剔除钝卷针头 , 一般用18G( 国际单位 ) 针头 , 针头长短视接种鸡群个体大 小而异。 ③针头注射一定数量 (100～500 只 ) 禽只后 , 一定要换用新的 , 如果有疫情发生 , 宜一只禽只用 一个针头。 ④注射器的维修保养 , 定期更换易损配件。 3.3.4 疫苗 ① 接种前将灭活苗升温至 25～30 ℃ , 并充分摇匀。 ② 接种过程中应不时摇动疫苗。 ③ 疫苗开启后要在 24 小时内用完。 ④ 灭活苗剂量宁多勿少。 ⑤ 疫苗分装不可打开瓶盖直接倾倒 , 以免污染 ( 可用连续注射器抽注 ) 。 3.3.5 皮下注射 ① 多采用颈部皮下注射法。 ② 本方法适用于活苗 / 灭活苗 。 ③ 屠体废弃率少→只处理颈部 , 较经济。 ④ 接种方法 : 接种时 , 用手轻轻提起鸡的颈部皮肤 , 将针头从颈背侧中段以下 , 接种方向朝远离头部的方向刺入 , 使疫苗注入皮下 , 皮肤与肌肉之间 。 注意勿伤及肌肉、血管、神经和骨头。 3.3.6 肌肉注射 ①腿肌注射法 —适用于笼养的商品蛋鸡群 —抓住鸡脚 , 朝身体方向刺入外侧腿肌 —应小心避免刺伤腿部血管、神经和骨头 ②胸肌注射法 —如果注射疫苗对胸肌的影响不是至关重要 , 而注射剂量又要求十分准确时 , 可采用此法 0 －在龙骨外侧胸部 1/3 处 , 以 18G 针头成 30 倾斜 , 朝背部方向刺入胸肌 －切忌垂直刺入胸肌 , 以免刺穿胸腔 －同时应避免刺得过深伤及骨膜 —进针太前易入嗦囊
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—太靠后易伤及内脏 —在翅膀靠近肩部无毛处的翼下内侧肌肉注射比较确实 ③尾部肌肉注射 －由于肌肉加工的需要 , 或者由于多次接种的原因 , 限制使用颈部、胸部、腿部和翅膀注射的方法 , 可 采用尾部肌肉注射 －将针头朝着头部的方向沿着尾骨的一侧刺入尾部 －为防止疫苗渗漏 , 不能过拨出针头 3.4 翼翅刺种法 3.4.1 重要性及优点 ①确保每只鸡都能得到准确的疫苗量。 ②免疫效果来得快。 ③免疫力佳。 ④适用于任何年龄的鸡只。 ⑤操作简便 , 但增加劳动强度。 ⑥针对性较强。 3.4.2 缺点 ①操作要求准确。 ②劳动强度高。 3.4.3 特点 ①多用于鸡症及 AE+POX 接种 。 ②适用于各种年龄的家禽。 ③细胞免疫。 ④英特威疫苗采用特殊的接头与稀释液混合溶解 ; 及特殊的双针槽的刺种针。 3.4.4 接种方法 ①将接种针充分插入疫苗溶液中 , 待针槽充满药液后 , 将针轻靠小瓶内壁 , 除去附在针上的多余药滴。 ②轻轻展开鸡翅 , 将针插入鸡翅翼膜内侧。 ③刺种针勿接触鸡羽。 ④刺种时 , 应小心拨开鸡羽 , 注意勿伤及肌肉、关节、血管、神经和骨头。 ⑤给 2 周龄以下小鸡接种时 , 最好每接种一瓶疫苗 (500～1000 鸡 ) 换一枚刺种针。 ⑥勿用不合适的针接种疫苗 ; 注意针槽勿向下。 ⑦免疫后 7～10 天检查结节。 免疫后 7～10 天无结节的原因 : 免疫接种不当 ;鸡症重复免疫接种 ; 已感染野毒 / 强毒。 注意点 : ①注意勿污染疫苗瓶及刺种针。 ②乳酪状渗出物→污染。 3.5 喷雾免疫 3.5.1 重要性及优点 : ①操作简便。 ②免疫效果来得快。 ③适用于任何年龄的鸡只。 ④局部免疫 : 上皮粘膜免疫系统 建立第一道免疫屏障。 3.5.2 缺点 ①免疫反应大。
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②ILT 反应大。 ③操作要求高。 3.5.3 喷雾免疫与气雾免疫比较 喷雾免疫 雾滴直径 作用范围 适用鸡龄 监测的解剖学部位 喙 口腔 喉头 气管 鼻腔 鼻孔 眼 泄殖腔 法氏囊 80～120μ m 上呼吸系统（结膜、鼻腔、气管上部） 1日龄雏鸡可用 饮水免疫 100 100 0 0 28* 40 0 100** 0 气雾免疫 ＜50μ m 下呼吸系统（鼻腔、气管、气囊、肺脏） ＞7日龄雏鸡可用 泄殖腔免疫 0 0 0 0 0 0 0 100 100
3.5.4不同接种途径疫苗病毒的分布 滴眼免疫 0 100 0 0 100 0 100 100** 0
注：*部分着色；**由肾排除而着色；0＝无着色 3.5.5家禽呼吸系统防御机制 纤毛 哈德氏腺 泪管 鼻腔 气管 支气管 细支气管 肺 + + + 机械性机制 粘膜 + + + 淋巴组织 + + + -* +** + ** 免疫学机制 抗体生成细胞 + ？ + 巨噬细胞 ？ ？ +
注：*病毒或MG感染；呈现淋巴细胞浸润；**散性淋巴细胞浸润 3.5.6 1日龄雏鸡的喷雾免疫 A. 全自动喷雾免疫 ① 最常用的疫苗是新城疫、传支和鸡球虫疫苗。 ② 局限在孵化室内使用。 ③ 用来稀释疫苗的水量取决于喷雾器的类型及型号。 ④ 每小时可免疫近万只鸡 。 B. 使用可调节喷嘴的人工喷雾器免疫 ① 1000 头份疫苗 +200 毫升水 (20 ℃ ) 。 ② 水质要非常好 , 最好用纯化水或去离子水 ,疫苗瓶要在水中开启 , 以便溶解疫苗。 ③ 喷雾器应绝对清洁 , 一定不能有消毒剂或洗涤剂残留。 ④ 喷雾时要调节好喷嘴大小 , 使雾滴大小合适 , 喷雾中定期检查及调节喷嘴。 ⑤ 喷雾前 , 把装有雏鸡的雏鸡盒互相靠在地上排成一行 , 绝不能放在靠近热源的地方 : 喷雾过程中 , 将喷嘴维持离地面约 40 厘米高度。
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⑥ 喷雾至雏鸡感到潮湿 , 但又不能淋湿它们为好。 ⑦ 免疫后 , 应让雏鸡在盒内停留 10～15 分钟。 3.5.7 较大鸡只的喷雾免疫 A. 农用喷雾器械等 : 1000 头份疫苗十 500 毫升优质水 B. 气雾法 : ①使用时散发一种非常细的薄雾 / 浓雾。 ②雾滴直径 <20 μ m。 ③采用此技术必须在鸡群处于最理想的健康状态时才可使用 , 缺乏操作经验的人员不要采用这种技 术。 ④进行气雾操作的人员必须戴上防护面罩。 3.5.8 注意事项 ①喷雾免疫应在封闭的鸡舍内进行 , 有通风设备的鸡舍 , 要关闭通风设备一段时间后 , 再进行免 疫。开放式鸡舍应该用防风窗帘封闭再喷雾 , 否则是没用的。 ②喷雾时 , 鸡舍内光线应该暗些 , 有窗户的鸡舍宜在黄昏进行喷雾免疫。 ③免疫后 , 要彻底清洗接种器械的内外部 , 最好用热水。 ④操作人员最好使用防护面罩 , 保护口鼻。 3.6 马立克疫苗接种 3.6.1 影响马立克疫苗接种成效的因素 ①疫苗品质。 ②解冻稀释及接种过程。 ③注射器材的清洁杀菌方式 。 ④接种鸡群爆发马立克病的最常见因素为对小鸡注射前的准备工作 , 疫苗的混合及处理方式不适当 。 3.6.2 马立克冷冻疫苗产品的准备 ①稀释及注射 : 自液态氮中取出疫苗时 , 每次只能取出马上要用的一瓶 , 其他的疫苗都必须立刻全部再放回液态氮 筒中 ; 当疫苗取出后及与稀释液混合的这段期间 ,如果超过 2 分半钟则其效价可能完全消失。 ②用来解冻疫苗的水温对于马立克疫苗效价的影响 水温 25℃ 40℃ 18℃ 当安瓶 ( 疫苗 ) 自液态氮取出时 , 应立即以温度适当的水来加以解冻 水的温度很重要 , 应当维持在 18～25 ℃之间 ③马立克冷冻疫苗在水中解冻时搁置时间对疫苗效价的影响 搁置时间 在水中30秒（对照） 5分钟 10分钟 15分钟 疫苗效价 100％ 83％ 68％ 47％ 疫苗效价 100％ 75％ 80％
安瓶 ( 疫苗 ) 的解冻以及疫苗与稀释液混合的操作 , 其整个过程应在 60 秒之内完成。
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④稀释液的温度对马立克冷冻疫苗效价的影响 稀释液的温度 对照（室温） 冰冻过的稀释液4℃ 疫苗效价 100％ 78％
稀释液应当随时维持在 (18～25 ℃ ) 来与疫苗混合 , 稀释液在与疫苗混合时 , 绝不可先冰冻过。 ⑤抗生素的添加 : 有很多种抗生素都对冷冻疫苗中的病毒有害 , 即使是未完全破坏它。 3.6.3 操作要点 ①每次都应以全新的塑胶无菌针筒 , 用 18G/ 1.5" 较粗的针头 , 以便将安瓶中的疫苗吸取并注入稀 释液中。 ②抽取少量的稀释液到针筒中 , 用以洗涤安瓶 , 上述过程应再重复 2～3 次。 ③洗涤空瓶的措施可回收剩余达 14% 的疫苗病毒。 ④疫苗混合及接种完毕 , 应在 30 分钟内完成 ,可保留疫苗之效价免受损失达 9% 。 ⑤吸取疫苗的动作应缓慢温和 , 混合的过程得温柔地操作 , 以免内含疫苗病毒的细胞受破坏。 ⑥要经常检查连续注射器及自动注射器是否有漏水注射器避免潮湿或肮脏 , 或与不洁的表面接触 , 自动注射器底板的钮附近是否会漏水。 ⑦接种作业都应在一个干净而隔离的地点进行 , 这是为了避免污秽及灰尘 , 以减少被污染的风险 3.6.4 检查法 ①许多孵化场都利用色素或是稀释液中的颜色来看小鸡注射部位的绒毛是否有被着色 , 如果有就表示 接种并不恰当。 ②这种着色检查法也可应用于少量的鸡(100～200 只 ) 来评价接种有失误的比率是多少。 ③如果靠近接种点的绒毛是湿的 , 就是对这只小鸡没有适当接种的指标。 3.6.5 小鸡的接种地点 ①上一批鸡群的绒毛屑是马立克病毒的主要媒介。 ②初龄小鸡如暴露于田间的马力克病毒 , 则马力克疫苗的接种效果可能只有 30%～40% 。 ③应将小鸡放在一清洁的 , 消毒过的环境来饲养。 ④小鸡越暴露于野外病毒 , 其疫苗的保护力就越好。 ⑤在有可能暴露于野外病毒的危险情况下 , 将纸张铺在垫料上来养小鸡 , 可使小鸡在头几天内尽量 避免与垫料接触 。 3.6.6 清洗及杀菌 每次疫苗接种完毕之后 , 一定要适当地清洗所有的注射器材。 A. 连续注射器的清洗 : ①即刻以清水冲洗注射器材。 ②分解注射器所有的零件 , 将其浸放盘中 , 以中性的清洁剂热水溶液中清洗。 ③取出后再以清洁的热水洗二次 , 以便除去所有清洁剂的残渣。 B. 连续注射器的杀菌 : ①注射器在灭菌前应以铝馅纸疏松地包扎。 ②注射器材应在高温高压灭菌锅 (AUTO-CLAVE) 中灭菌 (120 ℃ ,15PSI,20～30 分钟 ) 。 ③如果是用高压快锅来灭菌 , 则高压锅中的水应和灭菌托盘至少相隔 4 公分 , 以使器材是在蒸气中 , 而不是在滚水中煮。 ④这种高压快锅灭菌应以 15PSI 来作 60 分钟的灭菌。 C. 连续注射器的检查
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①所有的弹簧、阀珠及垫圈等都得大约在每2周或注射 200000 只小鸡之后即加以更换。 ②时常换新的零件是很重要的 , 主要是可以避免疫苗的漏失 , 使疫苗遭受污染。 总结 : ·鸡的基础免疫学与疫苗学有助了解疾病的 控制 , 免疫计划的设计及免疫失败原因的分析 ·免疫操作技术及其细节在饲养管理中非常重要. ·培训、监督、检测、考核是免疫成功之路
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