新兽药一般毒性试验技术要求

 

一、急性毒性试验

 

根据供试药物临床应用的给药途径不同，本试验可分为：

 

(一)经口或注射给药的急性毒性试验

 

1、动物

 

选用小鼠(体重18—22g)、大鼠(180—200g)或其他敏感动物。应注明动物品系。ÿ组小鼠不少于10只，大鼠不少于6只，雌雄各半，雌性应δ产无孕。

 

2、供试药物的配制

 

一般用水为溶剂，将药物配制成一定浓度的溶液。若选择其他溶剂或助溶剂，一般要求LD50>15000mg／kg。

 

3、给药方式与最大体积

 

经口急性试验宜用灌θ法，一次剂量直接灌入，给药前需禁食4—8小时，但不限制饮水。一次最大灌θ量，小鼠不超过1.0ml／只，大鼠不超过4.0ml／只。若灌θ量太大，可在24小时分成2—3次给药，但合并作为一日剂量计算。经注射急性毒性试验多采用腹腔注射，一次最大注射量，小鼠不超过1ml，大鼠不超过3ml。

 

4、剂量与分组

 

在正式试验前，首先用少量动物做预备试验，确定受试动物全部致死的最小剂量和全部不致死的最大剂量，正式试验一般分为5—7个剂量组。组间剂量呈等比级数，其比值为

 

1.2—1.4。

 

5、观察指标

 

观察动物一般健康状况，中毒表现和死亡过程。观察时间一般为一周。对死亡动物应作大体剖检，必要时进行病理组织学检查。

 

6、LD50计算

 

采用寇氏或机率单λ对数图解法计算供试药的LD50。值及其95％可信限范Χ。

 

7、结果评定

 

大鼠一次经口LD50在1mg/kg以下者为极毒，1—50mg／kg为剧毒，50—500mg／kg为中等毒，500—5000mg／kg为低毒，5000mg／kg以上者为实际无毒。

 

(二)经皮给药的急性毒性试验

 

1、动物

 

选用健康家兔(2.0—3.0kg)、豚鼠(350—450g)或大鼠(200—300g)。ÿ组动物不少于6只，雌雄各半。

 

2、供试药物的配制

 

供试药物如是固体，应磨成细粉状，过120目筛，并用适量水或无毒无刺激性赋形剂(橄榄油、羊ë脂、凡士林等)混匀。如为液体，一般不要稀释。

 

3、给药方式

 

脱去动物背部脊柱两侧ë发(不得损伤皮肤)，脱ë后24小时检查皮肤，如无损伤才能进行。