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抗腹泻中药发酵产品中总酸（以乳酸计）含量的检测方法

——自动滴定法
1范围
本方法规定了抗腹泻中药发酵产品中总酸（以乳酸计）含量检测的制样和自动滴定的测定方法。
本方法适用抗腹泻中药发酵产品及其他饲料中总酸（以乳酸计）含量的检测。
2 测定方法
2.1 方法提要或原理
试样经纯水（无CO₂）温水浴提取，选用0.1mol/L的NaOH做为滴定液，利用自动电位滴定仪测定，以试样溶液pH值为7.00作为滴定终点。按碱消耗量计算试样中总酸（以乳酸计）的含量。
2.2 试剂、材料及设备
2.2.1 试剂和材料
乳酸标准品：含量89.9%，Dr. Ehrenstorfer。
氢氧化钠（NaOH）：分析纯
酚酞：指示剂
邻苯二甲酸氢钾：基准试剂
无CO₂纯水：取适量纯水，煮沸10min，置凉备用。
0.1mol/L的氢氧化钠标准溶液：根据国家标准《GB/T 5009.1-2003 食品卫生检验方法理化部分总则》项目下的方法执行。

氢氧化钠饱和溶液：称取120g氢氧化钠，加100mL水，振摇使之溶解成饱和溶液，冷却后置于聚乙烯塑料瓶中，密塞，放置数日，澄清后备用。
氢氧化钠标准溶液[c(NaOH)=0.1mol/L]：吸取5.6mL澄清的氢氧化钠饱和溶液，加适量无CO₂纯水至1000mL，摇匀。
酚酞指示液：称取酚酞1g溶于适量乙醇中再稀释至100 mL。
标定：准确称取约0.6g在105℃~110℃干燥至恒量的基准邻苯二甲酸氢钾，加80mL无CO₂纯水，使之尽量溶解，加2滴酚酞指示液，用本溶液滴定至溶液呈粉红色，0.5min不褪色。同时做空白试验。
计算：氢氧化钠标准滴定溶液的浓度按式(1)计算。

c= ……………(1)
式中：
c——氢氧化钠标准滴定溶液的实际浓度，单位为摩尔每升(mol/L)；
m——基准邻苯二甲酸氢钾的质量，单位为克(g)；
V1——氢氧化钠标准溶液用量，单位为毫升(mL)；
V2——空白试验中氢氧化钠标准溶液用量，单位为毫升(mL)；
0.2042——与1.00mL氢氧化钠标准滴定溶液[c(NaOH)=1mol/L]相当的基准邻苯二甲酸氢钾的质量，单位为克(g)。
乳酸标准品储备液：准确称取乳酸标准品0.2225g，加入无CO₂纯水稀释，定容至100mL，浓度约2mg/mL，密封避光，4℃冰箱保存，有效期1个月。
2.2.2 仪器和设备
分析天平：感量0.0001g。
超声清洗仪
自动电位滴定仪
纯水仪
恒温干燥箱
离心机：转速不低于4000r/min。
2.3 测定步骤
2.3.1 提取
称取试样5.0000g，加入无CO₂纯水200mL，在温度60 ℃、功率100 W的条件下超声提取60min。提取结束后，冷却至室温，在4000r/min转速下离心10min，收集上清液用无CO₂纯水补足定容至250 mL，备用。
2.3.2 标准曲线的制备
准确量取适量乳酸标准储备液，用无CO₂纯水稀释成浓度分别为0.2mg/mL、0.6mg/mL、1mg/mL、1.56mg/mL、2mg/mL的乳酸标准工作溶液，供自动电位滴定仪测定。
2.3.3 测定
2.3.3.1 滴定条件
终点pH：pH=7.00
试样体积：50mL
温度：室温
2.3.3.2 测定法
各取50mL试样溶液和相应的标准工作溶液，参照自动电位滴定仪器说明书设置相关参数并进行自动滴定，到达滴定终点时，记录消耗的碱液体积。在上述滴定条件下，氢氧化钠的消耗量在6.2~6.8mL之间。
2.4 计算和表述
试样中总酸（以乳酸计）含量（%）：按式（2）计算。
X=

×100% ……………（2）
式中：
X——试样中没食子酸含量（%）；
c——NaOH标准溶液准确值，即0.1mol/L；
V——消耗NaOH的体积，单位L；
k——算的换算系数，乳酸0.090；
F——试液的稀释倍数，本方法为50倍；
m——样品的质量，单位为g。
注：计算结果保留小数点后2位。
3 产品标准
抗腹泻中药发酵产品中总酸（以乳酸计）的含量不得低于2.80%。

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